无菌车间设计与施工
1. 实验室设计
无菌实验室由六部分组成:准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室。 这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬,仪器设备陈设简单,易于清洁。
2、无菌实验室的基本要求
(1) 准备室
制备室用于培养基制备和样品处理。 房间内有试剂柜、存放器具或材料的专用柜台、实验台、电炉、冰箱、水和污水、电源等。
(2) 盥洗室
洗漱间用于洗涤餐具等。 由于使用过的器具已经被微生物污染,有时会存在病原微生物。 因此,在条件允许的情况下,最好设置洗漱间。 室内应配备取暖器、蒸笼、盆、桶等洗涤用具,以及各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
(3) 灭菌室
杀菌室主要用于培养基的杀菌和各种器具的杀菌。 房间内应配备高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备设施。
(4) 无菌室
无菌室又称接种室,是进行细菌系统接种、纯化等无菌操作的专用实验室。 在微生物工作中,菌种的接种和移植是一项重大操作。 该操作的特点是保证菌种纯种,防止杂菌污染。 在一般环境的空气中,由于存在很多灰尘和细菌,容易造成污染,大大干扰接种工作。
1、无菌室的设置
无菌室的设置应遵循经济、科学的原则。 基本要求如下:
(1)无菌室应有内室和外室,内室为无菌室,外室为缓冲室。 空气消毒的房间容积不宜过大。 最小内房面积为2×2.5=5m2,外房面积为1×2=2m2。 高度应小于2.5m,并应有天花板。
(2)内室应设置推拉门,以减少空气波动。 门应位于离工作台最远的位置; 外房的门也应该是推拉门,应该位于离内房最远的位置。 .
(3)在分隔内外室的墙上或“隔扇”上应开一个小窗,作为接种过程中货物内外通行的必要通道,以减少进入的人数。 离开内室,降低污染程度。 小窗宽60厘米,高40厘米,厚30厘米,内外挂着窗框。
(4)无菌室容积小而紧凑。 使用一段时间后,室内温度很高,应设置通风窗。 通风窗应设置在内室进门的天花板上(即离工作台最远的位置),最好是双层结构,外层是百叶窗,内层可以是窗扇 窗户。 内室使用后、消毒前可打开通风窗,使空气流通。 有条件的可以加装恒温恒湿机。
2. 无菌室内设备和用具
(1)无菌室内的工作台,不论是什么材质、用途的,都要求表面光滑和台面水平。
(2)在内室和外室各安装一个紫外灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方,离地面2m,外室的紫外线灯可安装在外室中央。
(3)外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
(4)内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
3. 无菌室的灭菌消毒
(1)薰蒸:这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
(2)喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。
(3)紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30~60min。
4. 无菌室工作规程
(1)无菌室灭菌。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min,对内外室用5%石炭酸喷雾。
(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室换上已灭菌的WORK服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。